| HCV多表位基因P815细胞系建成 |
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| 中国医药报 2006-03-16 |
近日，第四军医大学基础部微生物教研室韦三华博士等，在一项国家自然科学基金资助的课题研究中，成功建立一株丙型肝炎病毒（HCV）复合多表位基因P815细胞系。这一基因细胞系的克隆建立，为我国HCV疫苗的研究奠定了基础。
据介绍，在HCV感染过程中，极易产生变异株，给预防HCV感染的疫苗研制带来困难，使这一研究长期以来进展缓慢。有研究表明，HCV核心区在各种基因型HCV中最为保守，其诱导的细胞免疫应答对HCV感染的恢复起重要作用，对研制HCV疫苗有重要价值。因此，建立HCV疫苗的靶细胞，为HCV疫苗提供优质的研究平台，已成为科研人员关注的研究新思路。
韦三华博士等采用基因重组技术，把含HCV载短C基因、HVR1模拟表位基因与CTL基因串联，组成HCV复合多表位基因，构建穿梭质粒，筛选重组株，建成抗HCV的BCG新型疫苗。在此基础上，他们又将复合多表位基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1（-），通过脂质体转染P815细胞，经载体连接、转化、细胞培养及筛选，成功地克隆出多表位基因P815细胞系，为BCG疫苗实验提供了靶细胞。经检测，重组质粒pcDNA3.1（-）-CtEm在酶切阳性克隆鉴定下，其经测序列与设计序列完全一致，表明目的基因成功克隆入真核表达载体；转染细胞mRNA扩增后得到的450bp片段，与预期片段大小相符。同时还发现，克隆转染的P815的细胞系，可在多表位基因原核系统进行表达，其抗原性更强，更广谱，对HCV感染患者血清的反应率可达53%~80%。提示HCV复合多表位基因的真核表达载体及重组质粒转染P815细胞系构建成功。
本研究采用基因重组技术，在国内首次建成BCG新型疫苗的基础上，又成功地克隆出表达多表位基因的抗原特异性P815细胞系，它不仅成为稳定高效的靶细胞，而且为新型BCG活载体疫苗带来了良好的应用前景。
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